首页 | 了解HASUC | HASUC产品 | 产品咨询 | HASUC最新动态| HASUC资质| 技术文章| HASUC荣誉客户 | 索要HASUC样本| HASUC营销网络| 联系我们 | HASUC国际站
 
 
      全国免费客服热线: 400-880-6667
上海产品服务中心: TEL:021-5168-8813 FAX:021-5168-6613
 
企业新闻
 
恒温水浴箱对人血浆中盐酸克仑特罗浓度的测定
点击次数:2348 发布时间:2011-8-19
 
      盐酸克仑特罗(clenbuterolhydrochloride,CL),又名氨哮素、瘦肉精、双氯醇胺等,化学名为α [(叔丁氨基)甲基] 4 氨基 3,5 二氯苯甲醇盐酸盐,是一种β2 受体激动药。其松弛支气管平滑肌作用强而持久,临床上主要用于治疗支气管哮喘。由于药物半衰期长,在体内代谢慢,临床应用时,可能出现肌肉震颤、心慌、心悸、头疼、恶心、呕吐等症状,特别是对于高血压、心脏病、甲亢、青光眼、前列腺肥大等疾病患者危险性较大,可能会加重病情,导致意外,所以对CL的临床血药浓度监测非常重要。本实验采用HPLC-电化学法测定CL血药浓度,参考有关资料,着重对人血浆中CL的提取方法、色谱条件、内标物质的选择以及方法的准确性和重现性等进行了研究,并对患者血浆样本进行分析。
1材料
1.1仪器 
  岛津LC 6A高效液相色谱仪,LED 6A电化学检测器,JS 3030色谱工作站,超声波仪,恒温水浴箱(上海和呈仪器生产),高速离心机。
1.2药品与试剂 
  盐酸克仑特罗对照品(新乡同心制药厂,批号20030601,纯度98.7%),乙腈(色谱纯),辛基磺酸钠(Sigma),其余试剂均为分析纯。CL对照品和对苯二酚内标均用0.02mol?L-1HCl配制成标准储备液。
2方法与结果
2.1色谱条件 
  色谱柱:NucleodurC18(250mm×4.6mm,10μm);流动相:磷酸二氢钾缓冲液-乙腈=7∶3(V/V);磷酸二氢钾缓冲液内含0.02mol?L-1磷酸二氢钾,0.15mmol?L-1Na2EDTA,0.2mmol?L-1辛基磺酸钠,pH5.0,并通过0.45μm的滤膜过滤后与乙腈按比例混合,流速1.2mL?min-1,检测器电位0.80V(Ag/AgCl电极),进样量20μL。
2.2血浆样本的处理
取15mL离心试管依次加入0.2mol?L-1NaOH溶液2mL,0.5mg?L-1对苯二酚内标液100μL,肝素抗凝血浆样本1mL,混匀,加乙醚-乙醇(8∶2)提取液8mL,封盖,用超声波仪提取20min,3000r?min-1离心15min;取上清液转移至另一洁净试管中,加入0 .2mol?L-1NaOH2mL混匀洗涤,3000r?min-1离心5min,取上清液层转移至一洁净试管中,置60℃水浴上通N2挥干,残留用0.1mL流动相重组后,取20μL供高效液相色谱仪测定,用内标法以峰面积定量。
2.3系统适应性试验
通过对流动相的配比、pH、流速、检测电位的调整实验,确定在上述色谱条件下,空白血浆加内标及CL对照品的测试结果见图1。内标及CL保留时间分别为4.975、5.652min。两者分离度>5,达到基线分离,且无空白干扰。

  

2.4标准曲线的绘制 
  取空白血浆7份,每份1mL,各加入100μL内标液,分别加入适量标准溶液使之配成5、10、20、40、60、100、120μg?L-1的标准系列;按2.2项下操作测定,由色谱工作站直接求出CL对内标的峰面积比值(Y)与相应的浓度比值(X)的回归方程,Y=0.753X+0.011,r=0.9993。检出限为0.015μg?L-1(rSN=3),线性范围为1.5~120μg?L-1。
2.5回收率和精密度的测定 
  对高、中、低3份CL含量为5、20、40μg?L-1的标准血样分别按本法检测,其回收率分别为90.5%、94.7%、96.3%,平均为93.8%。同时3份样本按本法分别平行检测5次,RSD分别为2.6%、3.7%、4.2%。
2.6样品测定
我们采用该方法测定了3例患者口服CL后的血药浓度,患者每次口服该药30μg,服药后2.5h和24h静脉取血。结果见表1。


  

3讨论
  国内外文献报道的HPLC法测定生物样本CL的前处理方法中,采用乙醚-丁醇、己烷-乙酸乙酯等溶剂体系,提取回收率均偏低,影响检测灵敏度。因为盐酸克仑特罗在中性、酸性下易溶于水、甲醇、乙醇,不溶于乙醚等,而在碱性下可溶于乙醚。本实验在碱性条件下用乙醚∶乙醇混合比分别为6∶4、7∶3、8∶2、9∶1的4种混合提取液对同一份加标样品,各作3次平行对比测定。其平均回收率分别90.6%、92.2%、95.3%、93.6%。结果表明乙醚∶乙醇混合比8∶2作提取液时,其结果佳。
  本法处理样品简单,测定准确、快速,采用电化学检测器检测,专属性强,灵敏度高,且不受其他药物的干扰,更适用于临床盐酸克仑特罗血药浓度的监测。
恒温水浴箱
 
 
 
 
 
HASUC帮助
 
 
 
 
使用指南
产品询价
产品订购
 
 
配送支付
付款方式
配送方式
  
  
售后服务
货物签收与拒收
退换货原则
  
联系我们
诚招代理商
联系我们
  
  
 
 
  友情链接  
 
恒温箱
高低温试验箱
鼓风干燥箱
高温烘箱
干燥箱
热风循环烘箱
恒温恒湿箱
工业烤箱
工业烘箱
烘箱
真空干燥箱
恒温恒湿箱
工业烘箱
恒温恒湿试验箱
高低温冲击试验箱
高低温箱
版权所有:上海和呈仪器制造有限公司 © 2005-2010 沪ICP备09009017号-7